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抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行,也可以在機(jī)體外進(jìn)行。抗原抗體反應(yīng)的過程是經(jīng)過一系列的化學(xué)和物理變化,包括抗原抗體特異性結(jié)合和非特異性促凝聚兩個(gè)階段,以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化??贵w能特異性地識(shí)別相應(yīng)的抗原,并與之結(jié)合。這種結(jié)合在體外也能發(fā)生,這種抗原抗體反應(yīng)模式圖特性就是許多免疫檢測(cè)方法的基礎(chǔ)。抗原與抗體相互作用是非共價(jià)的,可逆的,其特性符合許多化學(xué)反應(yīng)的基本原理。但因?yàn)榭贵w分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),以及抗原分子結(jié)構(gòu)的多樣性,使抗原抗體結(jié)合反應(yīng)表現(xiàn)出復(fù)雜性 。抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)主要有四性:即可逆性、比例性、特異性、階段性。
1.可逆性
抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動(dòng)態(tài)平衡,其反應(yīng)式為:
Ag+Ab→Ag·Ab
抗體的親和力(affinity)是抗原抗體間的固有結(jié)合力,可以用平衡常數(shù)K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解離程度與K值有關(guān)。高親和力抗體的抗原結(jié)合點(diǎn)與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合,兩者結(jié)合牢固,不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性,因此可用親和層析法來提純抗原或抗體。在抗血清中,特異性的IgG抗體僅占總IgG中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體,稱為親和層析純抗體,應(yīng)用于免疫測(cè)定中可得到更好的效果。
2.比例性
比例性是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系,只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時(shí)才出現(xiàn)可見反應(yīng),在抗原抗體比例相當(dāng)或抗原稍過剩的情況下,反應(yīng)最徹di,形成的免疫復(fù)合物沉淀最多、最大。而當(dāng)抗原抗體比例超過此范圍時(shí),反應(yīng)速度和沉淀物量都會(huì)迅速降低甚至不出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)。在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復(fù)合物(沉淀)的量可繪制成一個(gè)曲線。曲線的高峰部分是抗原抗體比例最合適的范圍,稱為等價(jià)帶(zone of equivalence)。在等價(jià)帶前后分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。如果抗原或抗體極度過剩,則無沉淀物形成,在免疫測(cè)定中稱為帶現(xiàn)象(zone phenomenon)。抗體過量稱為前帶(prezone),抗原過量稱為后帶(postzone)。在用免疫學(xué)方法測(cè)定抗原時(shí),應(yīng)使反應(yīng)系統(tǒng)中有足夠的抗體量,否則測(cè)得的量會(huì)小于實(shí)際含量,甚至出現(xiàn)假陰性。
3.特異性
抗原抗體的結(jié)合實(shí)質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)之間。由于兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系,所以抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗原(HBcAg),隨來源于同一病毒,但僅與其相應(yīng)的抗體結(jié)合,而不與另外兩種抗體反應(yīng)。抗原抗體反應(yīng)的這種特異性使免疫測(cè)定能在一非常復(fù)雜的蛋白質(zhì)化合物(例如血清)中測(cè)定某一特定的物質(zhì),而不需先分離待檢物。
但是這種特異性也不是絕對(duì)的。假使兩種化合物有著部分相同的結(jié)構(gòu),在抗原抗體反應(yīng)中可出現(xiàn)交叉反應(yīng)。例如:絨毛膜促性腺激素(hCG)和黃體生成激素(LH)均由α和β兩個(gè)亞單位組成,其結(jié)構(gòu)的不同處在β亞單位,而兩者的α亞單位是同類的。用hCG免疫動(dòng)物所得的抗血清中含有抗α-hCG和抗β-hCG兩種抗體,抗α-hCG抗體將與LH中的α酶位發(fā)生交叉反應(yīng)。在臨床檢驗(yàn)中,如用抗hCG抗血清作為妊娠診斷試劑檢定尿液中hCG,只能用于hCG濃度較高的試驗(yàn),否則婦女生理性排泄入尿液中的微量LH將與之發(fā)生交叉反應(yīng)。因此在作為早孕診斷(敏感度應(yīng)達(dá)到50 mIu/ml hCG)的實(shí)驗(yàn)中必須應(yīng)用只對(duì)hCG特異的抗β-hCG,以避免與其它激素的交叉反應(yīng)的發(fā)生。
4.階段性:
抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段,第一個(gè)階段為抗原抗體的特異性結(jié)合階段,此階段是抗原與抗體間互補(bǔ)的非共價(jià)結(jié)合,反應(yīng)迅速,可在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)完成,一般不出現(xiàn)肉眼可見的反應(yīng)現(xiàn)象。第二個(gè)階段為可見反應(yīng)階段,是小的抗原抗體復(fù)合物間靠正、負(fù)電荷吸引形成較大復(fù)合物的過程。此階段反應(yīng)慢,需要時(shí)間從數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)至數(shù)日不等,且易受多種因素和反應(yīng)條件的影響 。