MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞說明書細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞說明書細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

1.56-100 ng/mL人核糖核酸酶抑制因子(Ribonuclease inhibitor)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mLELISA Kit for Human Ribonuclease inhibitor

0.156-10 ng/mL人骨骼型蘭尼定受體1(RYR1)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Ryanodine receptor 1

0.625-40 ng/mL人心肌型蘭尼定受體2（hRYR-2）ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mLELISA Kit for Human Ryanodine receptor 2

1.56-100 ng/mL人視黃醇結(jié)合蛋白1（RBP1）ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mLELISA Kit for Human Retinol-binding protein 1
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞說明書HCT116全細胞裂解液100ug100ug

人腺成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL

山梨酸發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口

Caki-2(人腎透明細胞細胞)5×106cells/瓶×2

RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)細胞)5×106cells/瓶×2gersion

HB611(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

TSCCa(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2gersion

Hela 299(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×2

A549全細胞裂解液100μg100μg

MS培養(yǎng)基(含維生素)/MS Medium with vitaminsBR10升國產(chǎn)/進口

抗生素Ⅲ號培養(yǎng)基/抗生素3號培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.3藤黃八疊球菌懸液的制備250克國產(chǎn)/進口

血瓊脂平板/Blood Agar Plate營養(yǎng)需求較高的細菌培養(yǎng)50塊國產(chǎn)/進口
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